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为什么冷冻后的全血不能用来做ELISA实验?
2024-09-27 16:20:19
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有些人提出全血提取出来放-70℃条件保存,等实验开始后再离心全血取血清或者血浆做ELISA实验,这种方法是不可取的, 一般建议全血样本提取好要及时离心出血清或者血浆。并要求-70℃条件下保存,如果一个月左右实验可以-20℃保存,期间就不要反复冻融了。为什么这么说呢,原因有以下两点:

 

1、全血冻存后解冻,用常规离心方式提取血清仍然是可以的,唯一不利的一点是,伴随冻融的过程,会出现比较严重的溶血事件。而最后提取出来的血清能否做elisa,主要取决于溶血程度、你所要检测的目标蛋白的性质及你实验的最终目的。

 

2、溶血释放的胞内组分往往容易影响本底,甚至出现假阳性;而蛋白酶的释放可能导致目的蛋白的降解最终影响结果;目的蛋白的大小、稳定性、特异性(相对抗体而言)有影响其自身与酶标板的吸附、自身降解、自身与抗体的结合率等等。以上各种不确定性因素存在下,如果你只是对血清中某种血清蛋白做定性检测的话,做elisa应该问题不大;若是定量分析的话,从可靠性的角度上看,不支持这么做。

 

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